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蛋白快速抽提
柱式动物组织/细胞总蛋白抽提试剂盒
产品货号:PC201
产品规格:50次
产品价格:498

柱式动物组织/细胞总蛋白抽提试剂盒
Column Tissue&Cell Protein Extraction Kit
本产品常温运输( 蛋白酶抑制混合 需冰袋运输)变性裂解液  天然裂解液 储存于4蛋白酶抑制混合 储存于-20,其它组分储存于常温。保质期12个月。

货号规格

goodPC201plus   50次
goodPC201plus   50次(含蛋白酶抑制剂混合液) 

产品内容

组分名称 PC201 PC201plus
变性裂解液 25 mL 25 mL
天然裂解液 25 mL 25 mL
蛋白酶抑制剂混合液 500 μL
纯化柱 50个 50个
收集管 50个 50个
塑料研磨棒 4根 4根


产品特点
gd操作简单快速——最快1 min即可得到变性总蛋白;
gd无蛋白丢失——可打开DNA双链,高效获取与DNA结合的蛋白;
gd小样本量、高得率——最小可处20 μL样本与裂解液混合物,提取的蛋白溶液浓度可2~8 mg/mL;
gd适用多种实验——含有两种裂解液,既可用于提取变性蛋白质,也可提取天然蛋白质。

产品简介

good本试剂盒创新性地采用过柱纯化的方法,能够快速、温和、高效地裂解动物组织或细胞,有效提取蛋白。试剂盒同时提供变性和天然两种裂解液,用户可根据下游实验需求进行选择。整个提取过程仅需1~8 min,由于采用过柱纯化技术,最小可处20 μL样本与裂解液混合物,最大可500 μL,提取的蛋白溶液浓度可2~8 mg/mL,并可有效避免蛋白丢失所提蛋白可采BCA法进行蛋白定量分析(货号ZJ101或ZJ102)不宜使用 Omni-Rapid™快速蛋白定量试剂盒(货号ZJ103) 

使用说明

goodA. 提取变性总蛋白

good1. 将纯化柱及收集管放在冰上预冷;

good2. 样品处理(取适当量的 变性裂解液 在使用前数分钟蛋白酶抑制剂混合液 按1:100加入其中PC201plus已包含 蛋白酶抑制剂混合液 ,PC201则需额外购买<货号GRF101>。) g

oodgood2a. 贴壁细胞将预冷1×PBS(货号PS110)直接加入培养板、培养皿或培养瓶中清洗贴壁细胞,吸去上清。按照附表(文末)中将相应体积的 变性裂解液 均匀加入整个器皿表面,用移液器吹打几次;
goodgood2b. 悬浮细胞低速离心收集细胞,1.5 mL离心管中加入预冷1×PBS,涡旋震荡3,000 rpm2~3 min清洗细胞。吸去多余上清,留下与细胞相同体积PBS,涡旋震荡重悬细胞。加入附表中相应体积的 变性裂解液 ,涡旋震荡裂解细胞;
goodgood注意:部分未完全裂解的细胞不会影响后续蛋白提取效果。
goodgood2c. 组织样本:将15~20 mg组织放置于纯化柱上,用塑料研磨棒扭转研50~60次,加200 μL 变性裂解液 ,继续研30~60次。如果组织样本起始量较大或者较小,需按比例调整相应裂解液的用量;
goodgood注意:塑料研磨棒可以重复使用,用蒸馏水彻底冲洗干净,用纸巾擦干。g

ood3. 离心

goodgood3a. 贴壁细胞或悬浮细胞:将裂解的细胞转移到预冷的纯化柱套管中14,000~16,000 rpm30 s取出;
goodgood3b. 组织样本:盖上纯化柱盖子室温孵1~2 min14,000~16,000 rpm1~2 min取出;

goo4. 立刻将收集管放置于冰上,弃去纯化柱,变性总蛋白提取完成。


 goodB. 提取天然总蛋白

good1. 将天然细胞裂解液,纯化柱及收集管放在冰上预冷;

good2. 样品处理(取适当量的 天然裂解液 在使用前数分钟蛋白酶抑制剂混合液 按1:100加入其中PC201plus已包含 蛋白酶抑制剂混合液 ,PC201则需额外购买<货号GRF101>。) 

goodgood2a. 贴壁细胞将预冷1×PBS(货号PS110)直接加入培养板,培养皿或培养瓶中清洗贴壁细胞,吸去上清。按照附表中将相应体积 天然裂解液 均匀加入整个器皿表面,放置于冰上孵3~5 min,用移液器吹打几次;

goodgood2b. 悬浮细胞低速离心收集细胞,1.5 mL离心管中加入预冷1×PBS,涡旋震荡3,000 rpm2~3 min清洗细胞。吸去多余上清,留下与细胞相同体积PBS,涡旋震荡重悬细胞。附表中相应体积的 天然裂解液 ,涡旋震荡裂解细15 s。将离心管放置于冰3~5 min,然后涡旋震10 s
goodgood注意:①部分未完全裂解的细胞不会影响后续蛋白提取效果
goodgood注意:②加入裂解液后,如果细胞裂解物太过粘稠,无法用200~1,000 µL吸头吹打,可将细胞裂解物直接倒入倒入纯化柱中,进行后续操作。
goodgood2c. 组织样本:将15~20 mg组织放置于纯化柱上,用塑料研磨棒扭转研磨50~60次,加入200 μL 天然裂解液 ,继续研磨30~60次。如果起始量较大或者较小,需调整相应裂解液的用量比例;
goodgood注意:塑料研磨棒可以重复使用,用蒸馏水彻底冲洗干净,用纸巾擦干。

good3. 离心 

goodgood3a. 贴壁细胞或悬浮细胞:将裂解的细胞转移到预冷的纯化柱套管中,14,000~16,000 rpm30 s取出;
goodgood3b. 组织样本:开盖冰上孵育5 min,盖上纯化柱盖子,4℃,14,000~16,000 rpm离心1~2 min取出;

good4. 立刻将收集管放置于冰上,弃去纯化柱,天然总蛋白提取完成。

附表 细胞数量与所需裂解液体积之间的关系

细胞数量(×106) 裂解液(μL)
0.3 20
0.5 50
1 100
2 200
3 500


注意事项
good1. 若使用本试剂盒裂解液裂解样本所得产物比较粘稠,此为正常现象;
good2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
good3. 本产品仅限科研使用。


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