经销商咨询
其他咨询
咨询热线
021-34781650
细胞培养系列

021-34781650

info@epizyme.cn

细胞增殖
细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)
产品货号:CX001M
产品规格:500次
产品价格:398

细胞增殖-毒性检测试剂盒
Cell Counting Kit-8(CCK-8)
本产品常温运输;2~8避光保存,保质期12个月;在-20℃条件可以贮存更久。

货号规格
goodCX001SLM 1 mL(100次)
goodCX001MLS 5 mL(500次)
goodCX001LMS 5 mL×5(2,500次)
goodCX001LMS 5 mL×20(10,000次)

产品简介
good本试剂盒可以对细胞增殖和细胞毒性进行快速、高灵敏度的检测,它的核心成分为一种水溶性四唑盐,在电子耦合试剂存在的情况下,这种四唑盐能够被线粒体内的脱氢酶还原生成橙黄色的水溶性甲臜染料。颜色越深,说明细胞增殖得越多越快,反之,则说明细胞毒性越大。对于相同的细胞,甲臜染料颜色的深浅与活细胞数目呈线性相关。

操作步骤
good  细胞活性检测
good  1. 
在96孔板中接种细胞悬液(100 μL/)。将培养板放在培养箱预培养24 h(在37,5% CO2的条件下);
good  1. 注意:具体每孔所的细胞数目,需根据细胞大小增殖速度等因素来决定。
good  2. 
每孔加入10 μL的CCK-8溶液(避免在孔中生成气泡,以免影响OD值的读数);
good  3. 将培养板置于培养箱内孵育1~4 h;
good  4. 用酶标仪测定在450 nm处的吸光度;
good  5. 如果暂时不测定OD值,可向每孔中加入10 μL 0.1 M HCl溶液或者1%(W/V)SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24 h内吸光度不会发生变化。

good  细胞增殖-毒性检测
good  1. 
在96孔板中接种细胞悬液(100 μL/)。将培养板放在培养箱预培养24 h(在37,5% CO2的条件下);
good  1. 注意:具体每孔所的细胞数目,需根据细胞大小增殖速度等因素来决定。
good  2. 
向培养板加入10 μL不同浓度的待测物质;
good  3. 将培养板置于培养箱内孵育适当的时(例如:6,12,24或48 h);
good  4. 每孔加入10 μL的CCK-8溶液(避免加入时在孔中产生气泡,以免影响OD值的读数);
good  5. 将培养板置于培养箱内孵育1~4 h;
good  6. 用酶标仪测定在450 nm处的吸光度;
good  7. 如果暂时不测定OD值,可向每孔中加入10 μL 0.1 M HCl溶液或者1%(W/V)SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24 h内吸光度不会发生变化。
good  1. 注意:如果待测物质有氧化性或还原性,可在CCK-8之前更换新鲜培养基,去药物的影响。当然如果药物影响比较小,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。

good  标准曲线制作
good  1. 
使用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞;
good  2. 按比例(例如:1/2比例)依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3~5个细胞浓度梯度,每组3~6个复孔;
good  3. 接种后培养2~4 h使细胞贴壁,然后加CCK-8试剂培养一定时间后测定OD值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X轴),OD值为纵坐标(Y)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(使用此标准曲线的前提条件是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK-8后的培养时间)。

注意事项
good1. 
初次实验时,建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK-8试剂后的培养时间;
good2. 若细胞培养时间较长,培养基颜色发生变化或pH发生变化,建议更换新鲜的培养基后再加入CCK-8试剂。含有酚红的培养基不影响本试剂盒做细胞活性的测定;
good3. 如果样品为高浑浊度的细胞悬液,建议设定600 nm(或600 nm以上)作为参比波长,扣除参比波长的OD值即可;
good4. CCK-8试剂对细胞的毒性低,CCK-8法检测后细胞仍然可正常生长,但为避免CCK-8试剂可能对后续检测造成影响,不推荐CCK-8试剂孵育过的细胞用于其它实验;
good5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
good6. 本产品仅限科研使用。


相关论文
good
YU, Qiang, et al. PPARγ/NF‐κB and TGF‐β1/Smad pathway are involved in the anti‐fibrotic effects of levo‐tetrahydropalmatine on liver fibrosis. Journal of cellular and molecular medicine, 2021, 25.3: 1645-1660.(IF 5.310)

版权所有 : Copyright © 2019上海雅酶生物医药科技有限公司(Epizyme Biotech) 网站建设备案号:沪ICP备2021002422号
立志成为中国本土Western Blot技术的产品专家